UPLC超高压装柱机的核心在于其采用高性能双泵头组成的超高压泵系统,能够达到18000psi。通过双活塞调节排量并结合恒压控制技术,实现梯度压力调整和流量范围广(0-12ml/min)的稳定输出。该系统集成了电脑软件反控功能,可多节点设置压力参数,实时反馈至控制系统自动调节溶剂流量,确保填充过程中系统压力恒定。这种精密的压力动态平衡机制为均匀装填提供了基础保障。
区别于传统色谱柱需要复杂的连接管路与接头,现代UPLC超高压装柱机采用无管路接头方案。例如,通过直连结构直接对接色谱柱及相关设备,消除了中间连接部件导致的死体积和泄漏风险,同时简化了安装流程。配合手紧式机械密封装置,操作人员手动旋转即可完成紧密固定,既避免了工具误操作带来的密封不良问题,又提升了系统的可靠性。
在高压作用下,带有微粒填料的匀浆液被高效注入色谱柱内腔。通过准确控制的线性流速和持续的压力波动补偿技术,确保微小颗粒在整个柱床内实现高度均匀的堆积密度。这一过程有效减少了传统装填方法可能产生的沟流或空隙率差异,从而优化分离效果。
UPLC超高压装柱机的测定步骤:
1.准备工作
-流动相处理:确保所使用的流动相经过过滤和脱气处理,以去除其中的颗粒杂质和溶解气体。这一步非常重要,因为任何微小的颗粒或气泡都可能影响柱效和后续的检测结果。
-样品预处理:对需要分析的样品进行适当的预处理,如过滤、离心等操作,以去除大分子杂质、颗粒物和不溶性物质。对于复杂样品,还可以采用固相萃取等方法进一步净化,以防止这些杂质进入保护柱造成堵塞或污染。
2.安装与连接
-保护柱与色谱柱连接:在拧紧过程中,要控制好力度,避免过度用力导致柱芯或卡套损坏,从而影响保护柱的性能。
-系统检查:在开始之前,仔细检查整个系统的密封性和连接是否牢固,特别是高压环境下的各个接口处,确保无泄漏现象。
3.参数设置与启动
-压力调节:根据实验需求设定合适的压力范围。UPLC系统的工作压力通常超过15,000 psi,可达18000psi,通过双活塞调节排量并实现恒压控制梯度压力。
-流量调整:设置所需的流量范围(一般为0-12ml/min),以保证均匀且稳定的填料填充过程。
4.装柱过程监控
-实时监测:在整个装柱过程中,密切监控系统的压力变化。如果发现系统压力异常升高,可能是由于保护柱或色谱柱存在堵塞问题,应立即停止分析并排查原因,避免过高的压力对设备造成损坏。