透明质酸钠测定
透明质酸钠(hyaluronicacid,简称ha)又名玻尿酸,是人体组织中保持水分最重要的物质,透明质酸是皮肤固有的天然生物分子,分子量较小的透明质酸可渗入皮肤表皮层,促进营养的供给和废物的排泄,从而防止皮肤老化,起到美容和养颜的作用。
本次根据透明质酸钠饮品测定标准T/CNFIA155-2022 ,为一种含透明质酸钠的固体饮料及其中透明质酸钠含量检测方法。
一、样品制备
1.样品前处理
取样品适量(相当于透明质酸钠10mg),置于烧杯中,加入3mL~5mL磷酸盐缓冲液,混匀。用0.1 mol/L 氢氧化钠溶液或0.1mol/L盐酸溶液调节pH值至6.0后,用磷酸盐缓冲液转移并定容至10 mL容量瓶中,混匀。
2.酶解
准确移取 0.50 mL上述处理后的样品溶液至10mL离心管中,补加磷酸盐缓冲液至5mL,再加入1 mL透明质酸酶溶液,混匀,42℃水浴中酶解2h。沸水浴2min,终止反应。冷却至室温后,将上述酶解液转移至10mL容量瓶中,用磷酸盐缓冲液定容并摇匀。经0.22μm水相滤膜过滤后供高效液相色谱测定。
二、色谱柱选择
色谱柱:Morphling Sugar-H 7.8*300mm 8μm
检测波长:232nm
柱温:40℃
流动相:1%磷酸水溶液
流速:0.6ml/min
进样量:20μl
三、色谱图