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UHPLC色谱柱使用注意事项

 发布时间:2022-08-11 点击量:61
  UHPLC色谱柱的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能分配的不同,或其亲和性的差异,使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用,从而使各组分分离.色谱法在有机化学中的应用主要包括分离混合物,精致提纯化合物,鉴定化合物,观察一些反应是否完成等等;吸附色谱主要以氧化铝、硅胶等为吸附剂,将一些物质自溶液中吸附到它的表面,而后用溶剂洗脱或展开,利用不同化合物受到吸附剂的不同吸附作用,和它们在溶剂中不同的溶解度,也就是利用不同化合物在吸附剂和溶液之间的分布情况不同而得到分离。吸附色谱分离课可采用柱色谱和薄层色谱两种方式。
 
  UHPLC色谱柱使用注意事项:
 
  ·使用时请按照色谱柱标签上的箭头方向来进行通液操作。
 
  ·请确认系统压力计的数值为零后再进行色谱柱的拆卸。
 
  ·柱压以100Mpa左右为上限基准。连续在上限压力附近使用以及压力急剧变化的情况都会造成色谱柱使用寿命缩短,请多加注意。使用乙腈作为流动相时,推荐流速为色谱柱50*2.0mm l.D.时0.3~0.8mL/min,50*3.0mm l.D.时0.6~1.8mL/min左右。柱压会根据柱长、柱温、以及有机溶剂种类的不同发生变化,请适当调整流速。
 
  ·从水性溶剂到非水性溶剂都可使用,但在不同的溶剂之间进行反复置换会导致分析柱的性能降低。一般可使用的有机溶剂为乙腈,甲醇,四氢呋喃(THF)等。使用THF时请注意PEEK管材的耐有机溶剂性能。
 
  ·如需置换流动相,请注意有机溶剂之间的混合性和盐的析出现象。另外为了使样品和溶解样品的溶剂中所含盐类不发生析出现象,请确认他们对于流动相的混合性后再进行注入。
 
  ·样品尽量使用和初期流动相同一组成的溶剂来进行溶解。如使用溶解性比流动相更高的溶剂,峰可能会变宽,并导致分离度和重现性下降。
 
  ·为了预防因筛板的堵塞而引起的柱压上升,流动相及样品溶液请预先使用0.2um以下的过滤膜进行过滤。
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