制备液相色谱技术(Preparative High Performance Liquid Chromatography, PHPLC),是一种在化学、制药、生物技术等领域中广泛使用的分离和纯化方法。
制备液相色谱仪的使用注意事项:
1.流动相选择:
-流动相应采用色谱纯溶剂,避免使用有污染的水等冲洗色谱柱。
-严禁使用不相溶的溶剂,避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内。
-流动相需经过滤、除气后方可使用,以避免柱塞、密封环、缸体和单向阀等部件的磨损。
2.色谱柱维护:
-避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
-调节流速时应该缓慢进行,以防止冲动柱内填料。
-一般说来色谱柱不能反冲,除非生产者指明该柱可以反冲。
-选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。
-定期对色谱柱进行清洗和保养,以延长其使用寿命。
3.仪器操作:
-严格按照实验流程进行操作,确保实验结果的准确性和可重复性。
-注意仪器的日常维护和校准,确保仪器的正常运行和数据的准确性。
-在使用新色谱柱前,应检查柱中当前是何种溶剂,并确保其与分析样品所用流动相互溶。
-在梯度洗脱时,要注意溶剂的互溶性,避免产生沉淀或析出盐的微细晶体。
4.安全防护:
-使用有毒或腐蚀性化学品时,应佩戴适当的个人防护装备。
-确保实验室通风良好,以避免有害气体的积聚。
-遵守实验室安全规定,妥善处理废液和废弃物。
制备液相色谱的测定步骤包括准备、装柱与平衡、上样与分离、检测与收集以及数据分析等环节。在使用过程中需要注意流动相的选择、色谱柱的维护、仪器的正确操作以及安全防护等方面的问题。