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低聚半乳糖新国标-检测结果

 更新时间:2024-06-11 点击量:102

低聚半乳糖(GOS)是一种常见的功能性低聚糖,可作为益生元添加到食品中,也可以作为保健品使用。目前低聚半乳糖的新国标GB5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的测定》开始正式实施。

由于低聚半乳糖没有紫外吸收基团,一般检测方法是使用通用性检测器,但灵敏度较差,因此常会选择对目标物进行衍生后检测。2-氨基苯甲酰胺因为具有较强的荧光信号,被广泛的应用于还原性糖衍生检测。在色谱分析中对于糖类的检测主要差异是亲水作用力,所以常选择亲水模式进行分离。基于以上原理,GB5009.289-2023采用2-氨基苯甲酰胺作为衍生剂,使用高效液相色谱法进行检测。

参照GB5009.289-2023要求,使用S6000高效液相色谱搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide色谱柱进行食品中低聚半乳糖的测定,

分析条件

仪器:S6000 FL

色谱柱:和曦科技Morphling HILIC-Amide, 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 Å

流动相:A:甲酸铵溶液,B:乙腈

柱温:30 ℃

激发波长:355 nm

发射波长:430 nm

流速:1.0 mL/min

进样量:20 μL

 

实验结果

前处理方法

称取1.0 g试样,用水定容至50 mL并混匀,作为试样液。

吸取20 μL试样液,加入200 μL 2-氨基苯甲酰胺衍生溶液,涡旋混匀,在60 ℃水浴中保温120 min,放至室温后,加入1 mL乙酸铵溶液(0.2 mol/LpH=4.50)涡旋混合。移取0.5 mL混合溶液,加入200 μL淀粉葡糖甘酶溶液(180 U/mL),50 ℃水浴保温30 min。放至室温后,加入0.7 mL乙腈,混匀后6000 r/min离心5 min,上清液用0.22 μm有机滤膜过滤后,待测。

使用同样方法对标准品进行衍生后,待测。

标准品检测

采用上述液相方法,对混合标准品进行衍生化后上机检测。结果如下图所示,结果表明,7种化合物峰形较好,分离度满足要求。

image.png 

1  7种标准溶液衍生物色谱图

A:空白溶液;B:混合标准品溶液)

1 麦芽糖衍生物、2 乳糖衍生物、3 麦芽三糖衍生物、4 麦芽四糖衍生物、5 麦芽五糖衍生物、6 麦芽六糖衍生物、7 麦芽七糖衍生物)

结论

采用S6000高效液相色谱仪搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide( 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 Å)色谱柱进行食品中低聚半乳糖检测,各化合物分离度、线性、灵敏度均满足GB 5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的测定》的要求。