HX200型湿法制备装柱机

一、产品简介：

HX200型色谱装柱机是USA进口气液高压增压泵，采用高压气动增压原理，放大比为1：72，驱动气体压力为：0.6-0.8MPa , 最高压力：11000psi,最大输出流量1140ml/min 是湿法填充高效液相色谱柱的专用设备。系统采用进口增压泵，气动液压效果密封稳定，具有压力高，升压快，回压小，便携式，结构简单，便于色谱柱的装填和拆卸，维护使用方便，外型美观等特点。通过对驱动气压力的调整，可以对输出液体压力无级调节；当驱动气压力与输出液体压力平衡时，气动泵便停止动作，输出压力也稳定在预调的压力上。通过控制气源的进气量，可以控制泵的动作频率，从而控制系统的输出流量。整套系统具有体积小.重量轻.操作简单.安全可靠.适用范围广.输出压力可调等优点。用HX200 型色谱装柱机填装的高效液相色谱柱性能稳定，柱效高，对称性好，不塌陷，是较为理想的装柱设备，根据装柱需求可配备不同规格接头，可填装不同型号的液相色谱柱。适合科研单位小型化研发应用。

二、气液增加泵示意图

三、增压泵的结构及工作原理：
1、利用在两个独立腔体内端面积不同的大小活塞（柱塞）运动，通过力的平衡原理，在低压腔给大面积活塞施加小的压力，高压腔内小面积活塞（柱塞）便能输出大的压力。面积比越大的泵输出的压力越高。

输出压力计算公式：
输出压力=驱动气体压力×压力比（大小活塞面积比）
2、通过压缩空气驱动，调节压缩空气压力即可改变输出压力
3、调节压缩空气的流量可以改变增压泵的动作频率，从而改变输出流量的大小
4、输出压力与驱动压力成线性比例关系，容易实现控制操作
5、当达到设定输出压力，大小活塞达到里的平衡，增压泵停止工作，此时不再消耗能量，也没有任何热量产生，具有良好的压力保持特性，当有压力泄漏时，增压泵自动补充压力
6、无需任何润滑油，不产生热量和火花

四、技术参数：

产品型号：       HX200型

工作介质：       水、有机溶剂等

最大驱动气压力：  0.8Mpa

最大输出压力：    11000psi（使用压力7000psi）

输出排量：        19ml/cycle （1140ml/min)    

进出口 ：         ZG1/2-1/8      

压力比：          72：1

五、产品操作流程：

6-1装柱机安装检查：

1、气路连接：保证起源连接为0.6-0.8Mpa，气源接通检查气压，泵正常驱动。

2、液路连接：正常选择顶替液为甲醇溶剂，连接好溶剂连接管，确保管路运行过程中没有气泡，先运行泵排出管路及泵体中气泡，以防影响装柱效果。

3、试运行后准备装柱。

6-2、例20*250mm 10um C18装柱流程。

1) 匀浆液：乙醇-异丙醇=1：1

2) 混合比：填料-匀浆液=1：7-10

3) 匀浆过程：称取60-70g填料加匀浆液500-550ml润湿后，混合匀浆用搅拌器搅拌混合5min，再超声搅拌5min。

4) 进行装柱：

5) 将匀浆液均匀倒入设计好的匀浆罐中，用甲醇作为顶替液，开始装柱

6) 气压泵流体量调节：

7) 开始压力控制2000psi，顶替完柱内匀浆液（2min）后调节压力阀（10s）调节一次，每次500psi，调节压力至6000psi，保持压力，待装柱时间到1500ml进行降压，再将压力下调，10s调节一次，每次500psi，下降压力至2000psi后，再将流量阀关闭，保持5-10min后，可将色谱柱拆卸。

8) 制备柱密封：

9) 拆下色谱柱后，填料在受压后凸出，待凸出稳定后，将多余部分的填料围绕周边转圈刮去，最后留着柱头端微微凸起状态，将密封筛板压紧，拧紧螺帽，装柱完毕。

10) 进行色谱柱评价测试；

例如：Morphling WD-C18 20*250mm 5um

流动相：纯甲醇，流速：10.0ml/min,进样量：500ul，波长：254nm，标品：甲苯

六、维护保养：

（1）本设备的操作人员必须接受相应的培训，熟悉设备的工作原理.操作程序.日常保养等。

（2）空气过滤器中的积水要随时排放。（滤芯每三个月清洗或一年更换）

（3）本系统使用的气体介质必须保持清洁，要定期清洗管路过滤器内的滤网。

（4）由于设备在运输过程中的震动可能导致各管路或阀门等连接松动，所以在每次运输设备后的第一次使用时，要密切观察各个接头是否有因松动导致的泄露并采取相应措施处理，如有任何疑问请致电本公司售后服务部

（5）经常保持设备的清洁.卫生. 

（6）定期检查，保持零件.部件的完整性。

（7）将夹具接头放置在干燥清洁的地方. 

（8）确保驱动空气是洁净干燥的气体，以防损伤增压泵的密封件和单向阀等配件

七、色谱柱装填注意事项：

1） 色谱柱的装填过程需要仔细、认真，任何失误都会造成色谱柱装填的失败。因此，在装填过程中，一定要注意设备的清洁；装填之前，色谱柱柱管要用适当的溶剂清洗*。

2） 不同的填料因其性质不同，具体装填的工艺也有所差异；具体的装柱条件应根据所选的填料相应改变；工艺的摸索过程中，装填的压力应由小到大递增，压力太大，会损坏填料，造成柱床不均匀，根据填料最大耐受压力进行填装。

3）色谱柱装填完成之后，在使用过程中应注意日常保养：所使用的溶剂应确保经过过虑；当次制备工作完成之后，色谱柱应*冲洗。反相色谱柱在搁置期间应用有机溶剂（如甲醇或乙腈）充满，应避免纯水长时间停流在色谱柱中。

5）制备柱清洗

强保留物质和大分子化合物在制备柱中累积，是一个缓慢的过程，一段时间后会对样品成分产生强保留行为，引起峰变宽，拖尾，使柱效下降，保留时间变化，到一定程度时会导致柱压升高。因此要对制备柱进行日常保养和清洗，方法如下：

A、流动相中不含有缓冲盐或者盐类物质的情况下，使用高比例有机相来洗脱强保留物质，或者使用100%的有机相(甲醇，乙腈，甲醇-异丙醇=90：10清洗。特别对于脂溶性较高的成分在制备柱中吸附，可以通过添加10%THF的方法可以取得很好的效果。

 B、流动相中含有缓冲盐或者盐类物质，避免使用时盐析出使用前流动相前用甲醇/水＝10/90过渡冲洗，再使用流动相 对色谱柱的清洗方法也是同样使用用甲醇/水＝10/90，然后再使用上述方法清洗。

C、如果蛋白质或者多糖等高分子附着在柱内，一般很难清洗去除附着物，建议使用乙腈：水：TFA=50:50:0.1流动相体系进行冲洗.